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外源基因导入黑腹果蝇体内表达


UAS+GAL4,GAL80

 

  外源基因转入黑腹果蝇基因组并在体内表达,一般通过GAL4-UAS二元调控系统实现,但当GAL4由全身表达的强启动子驱动时,外源基因会在黑腹果蝇所有细胞过量表达,进而产生毒性,导致果蝇生存能力下降甚至死亡,给基因功能的研究带来不便。
  为了解决上述问题,芳景生物构建了3号染色体Tubp-GAL4,Tubp-GAL80ts果蝇品系,实现通过饲养温度控制外源基因表达量。
 
  技术流程:
  ① 将外源基因CDS克隆到UAS定点载体,制备donor DNA样品;
  ② 注射2号染色体attP果蝇,获得UAS转基因果蝇品系;
  ③ 与Tubp-GAL4,Tubp-GAL80ts果蝇杂交构建,获得2,3号染色体双平衡的UAS;GAL4,GAL80ts稳定品系;
  ④ 通过控制果蝇饲养温度来调节GAL80表达水平,进而不同程度地影响GAL4功能,最终实现外源基因表达量的控制。

 

具体服务流程与周期请在登录后查看,欢迎来电咨询。

图1. 外源基因导入表达示意图
 
  目前,芳景生物已经构建了几百种外源基因过表达的果蝇品系,覆盖了节肢动物门的多个热门物种,包括:蛛形纲真螨目,昆虫纲双翅目、鳞翅目、同翅目、膜翅目、缨翅目、直翅目、蜚蠊目等许多大类。